Na análise por cromatografia gasosa (CG) de amostras com uma variedade de componentes, pode-se utilizar a técnica de Programação de Temperatura para melhorar a resolução do cromatograma. Em cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), como se chama o procedimento análogo que pode ser utilizado com o mesmo propósito?
Passo 1
Beleza, então o exercício tá perguntando o seguinte: na cromatografia gasosa a gente usa “programação de temperatura” (aumentar a temperatura do forno ao longo do tempo) pra separar melhor compostos que têm pontos de ebulição diferentes. A pergunta é: em HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência), qual é o procedimento equivalente? O conteúdo aqui é cromatografia líquida, mais especificamente os modos de eluição (isocrático vs gradiente) e como isso afeta a separação. Pra resolver, a gente precisa entender o que é eluição isocrática, por que às vezes ela não dá conta de separar tudo bem e como o gradiente resolve isso.
Passo 2
Primeiro, vamos relembrar um ponto básico de HPLC: em muitos casos a gente mantém a composição da fase móvel fixa durante toda a corrida, e isso chama-se eluição isocrática. Por exemplo, se a gente mistura 70% de água e 30% de metanol e não mexe nisso, é isocrático. O problema surge quando alguns analitos retêm demais (saem tarde demais) e outros eluem muito rápido — a resolução (distância entre picos) fica ruim para alguns compostos.
Passo 3
Aí entra a ideia da eluição em gradiente. Em vez de manter sempre a mesma mistura (isócrata), a gente vai variar, ao longo do tempo, a proporção dos solventes — normalmente aumentando a fração do solvente orgânico mais “forte”. Por exemplo, passar de 5% de metanol pra 95% ao longo de 30 minutos. Assim, compostos fracos eluem cedo, e compostos mais fortemente retidos são “forçados” a sair quando a fase móvel fica mais forte. Isso melhora muito a resolução geral do cromatograma.
Passo 4
Em resumo, o “análogo” da programação de temperatura da GC na HPLC é justamente programar o gradiente da fase móvel — ou seja, mudar a composição do solvente ao longo da corrida pra otimizar a separação.
Resposta
O procedimento análogo em HPLC é a eluição em gradiente (programação de gradiente da fase móvel).