Quais as formas de se promover a hidrólise de proteínas?
Passo 1
O enunciado pergunta quais são as maneiras de promover a quebra das ligações peptídicas em proteínas (hidrólise de proteínas). O conteúdo envolve reação de hidrólise de ligações amida e usa métodos químicos (ácido, base, reagentes específicos) ou enzimáticos (proteases). Para resolver, precisamos conhecer as condições de pH, temperatura e os principais agentes catalíticos.
Passo 2
Hidrólise ácida: consiste em aquecer a proteína em meio fortemente ácido, por exemplo refluxar em solução de
M a
por cerca de
h. O ácido protona o oxigênio do grupo carbonila, tornando o carbono mais eletrofílico e facilitando o ataque da água, quebrando a ligação peptídica e liberando aminoácidos livres.
Passo 3
Hidrólise alcalina: usa um meio fortemente básico, como solução de
–
M a temperaturas elevadas. A base desprotona grupos –NH do peptídeo, tornando o nitrogênio mais nucleofílico para atacar a própria ligação, gerando fragmentos peptídicos e racemização parcial dos aminoácidos, o que limita sua aplicação analítica.
Passo 4
Hidrólise enzimática: emprega proteases específicas que atuam em condições brandas de
e temperatura. Exemplos:
Pepsina em
–
a
, cliva preferencialmente ligações envolvendo resíduos aromáticos.
Tripsina em
–
a
, cliva ligação após lisina e arginina.
Quimotripsina, elastase e carboxipeptidases, cada uma com especificidade de sítio de clivagem.
Passo 5
Hidrólise química específica (reagentes de clivagem): utiliza substâncias que quebram seletivamente ligações peptídicas em certas sequências, sem degradar toda a cadeia:
Brometo de cianogênio (
) cliva à direita de resíduos de metionina.
Iodobenzoato de fenila direciona clivagem em triptofanos.
Hidrazinolise para clivar grupos carboxila C-terminais.
Resposta
Ácida (refluxo em
M,
);
Alcalina (solução de , alta temperatura);
Enzimática (pepsina, tripsina, quimotripsina etc. em controlado);
Química específica (brometo de cianogênio, iodobenzoato, hidrazinolise).
Alcalina (solução de
Enzimática (pepsina, tripsina, quimotripsina etc. em
Química específica (brometo de cianogênio, iodobenzoato, hidrazinolise).