Ainda em relação ao protocolo de extração de DNA plasmidial, explique qual(is) a(s) função(ões) das seguintes soluções (máximo 3 linhas para cada item!):
Solução C (acetato de potássio
)
Solução C (acetato de potássio
Passo 1
Beleza, o enunciado pede pra explicar a função da Solução C (acetato de potássio 3 mol L⁻¹, pH 4,8) no protocolo de extração de DNA plasmidial.
Matéria: purificação de ácidos nucleicos. Vamos precisar entender como a neutralização da lise alcalina e a precipitação seletiva se dão.
Matéria: purificação de ácidos nucleicos. Vamos precisar entender como a neutralização da lise alcalina e a precipitação seletiva se dão.
Passo 2
A Solução C acidifica e neutraliza o NaOH e o detergente (SDS) usados na lise, fazendo o pH cair e formando o sal de dodecil sulfato de potássio insolúvel.
Esse precipitado arrasta proteínas e DNA cromossômico pra um pellet, enquanto o DNA plasmidial, por ser pequeno e superenrolado, permanece solúvel no sobrenadante.
Esse precipitado arrasta proteínas e DNA cromossômico pra um pellet, enquanto o DNA plasmidial, por ser pequeno e superenrolado, permanece solúvel no sobrenadante.
Resposta
A Solução C serve para neutralizar a lise alcalina e precipitar SDS, proteínas e DNA genômico, deixando o DNA plasmidial no sobrenadante.