Ainda em relação ao protocolo de extração de DNA plasmidial, explique qual(is) a(s) função(ões) das seguintes soluções (máximo 3 linhas para cada item!):
Solução A
Solução A
Passo 1
O enunciado pede para explicar a função da Solução A no protocolo de extração de DNA plasmidial.
Conteúdo: princípios de buffers em biologia molecular (ressuspensão de células, tamponamento e inibição de enzimas).
Conteúdo: princípios de buffers em biologia molecular (ressuspensão de células, tamponamento e inibição de enzimas).
Passo 2
– Solução A é o buffer de ressuspensão, normalmente contendo glicose, Tris e EDTA.
– A glicose mantém a pressão osmótica, evitando lise prematura das células.
– O Tris estabiliza o pH (~8,0) e o EDTA complexa íons , inibindo DNases que degradariam o DNA.
– A glicose mantém a pressão osmótica, evitando lise prematura das células.
– O Tris estabiliza o pH (~8,0) e o EDTA complexa íons
Resposta
Solução A atua como buffer de ressuspensão, garantindo integridade celular (glicose), tamponando o pH (Tris) e protegendo o DNA da degradação por DNases (EDTA).