Especifique a função dos seguintes reagentes utilizados no método do Biureto: sulfato cúprico, hidróxido de sódio e tartarato duplo de sódio e potássio.
Passo 1
O que o enunciado pede: especificar a função de cada um dos reagente usados no método do Biureto. Os reagentes listados são:
-
(sulfato cúprico); -
(hidróxido de sódio); - tartarato duplo de sódio e potássio, fórmula comum
(tartarato de Rochelle).
Passo 2
Breve contexto didático sobre o método do Biureto para entender por que cada reagente é necessário.
O teste de Biureto detecta ligações peptídicas — isto é, presença de proteínas ou peptídeos com pelo menos duas ligações peptídicas. A reação que gera a coloração violeta ocorre porque íons cobre(II) formam complexos de coordenação com os pares de elétrons dos nitrogênios das ligações peptídicas quando o meio é fortemente básico. A intensidade da cor é aproximadamente proporcional ao número de ligações peptídicas, por isso o método é usado para estimar proteína.
Passo 3
Função do
(sulfato cúprico).
- O papel principal de
é fornecer os íons , que são os agentes que se ligam às ligações peptídicas e formam o complexo colorido violeta. - Sem
não há formação do complexo observável; portanto é a fonte dos reagentes de cor / sinal. - Reação simplificada mostrando o perigo de precipitação em meio básico (que o tartarato evita; ver passo seguinte):
Passo 4
Função do
(hidróxido de sódio).
-
fornece o meio fortemente básico necessário para que os nitrogênios das ligações peptídicas coordenem eficientemente com . - Em termos práticos: em meio alcalino aumenta-se a densidade eletrônica disponível nos pares de elétrons do nitrogênio das amidas, facilitando a formação da ligação de coordenação com
e a consequente mudança de cor. - Além disso,
é necessário para gerar as espécies de cobre que participam do complexo; porém, se não houver estabilizante, o excesso de precipita (ver equação no passo 3), o que impediria a formação do complexo colorido dissolvido.
Passo 5
Função do tartarato duplo de sódio e potássio
.
- O tartarato atua como agente quelante/complexante e estabilizante dos íons
em solução alcalina. - Especificamente, ele forma complexos solúveis com
, evitando a precipitação de quando o meio está fortemente básico. Assim, mantém cobre disponível na forma dissolvida para reagir com as ligações peptídicas. - Em termos práticos: o tartarato “segura” o cobre em solução, permitindo que
coordene com as amidas ao invés de formar um precipitado inerte. Também ajuda na reprodutibilidade e sensibilidade do ensaio, reduzindo interferências por outras espécies metálicas.
Passo 6
Como os três reagentes atuam juntos — mecanismo simplificado e o porquê disso gerar cor violeta.
- Ordem e papel conjunto:
-
cria o meio alcalino necessário. -
fornece que pode complexar. - O tartarato complexa parcialmente
, mantendo-o solúvel e disponível.
-
- Em presença de peptídeos/proteínas, parte dos íons
forma um complexo de coordenação com os nitrogênios das ligações peptídicas, dando origem à coloração violeta característica. A intensidade dessa cor é proporcional, grosso modo, à quantidade de ligações peptídicas presentes. - Equação representativa (muito simplificada, mostrando interação qualitativa):
Passo 7
Observações práticas e de prova (dicas rápidas e comuns).
- Sem
não ocorre a coordenação eficaz; sem não há sinal; sem tartarato corre o risco de precipitar e perder sensibilidade. - O tartarato usado é geralmente o tartarato de Rochelle (
), e sua função é mais de estabilização/quelatação do que de reagente colorimétrico. - Interferentes: aminas primárias fortes ou outras substâncias redutoras/quelantes em excesso podem alterar o resultado — por isso em análises quantitativas é importante controle de matrizes.