Estimativa da \boldsymbol{V}_{\text {máx }} \mathbf{e}á do \boldsymbol{K}_{\mathbf{m}} por inspeção. Embora haja disponibilidade de métodos gráficos para a determinação precisa da V_{\text {máx }}á e do K_{m} de uma reação catalisada por enzimas (ver Quadro 6-1), algumas vezes essas grandezas podem ser rapidamente estimadas pelo exame dos valores de V_{0} aumentando com a [\mathrm{S}]. Estime os valores de V_{\text {máx }}á e de K_{\text {m }} da reação catalisada por enzima na qual foram obtidos os seguintes dados.
S \boldsymbol{V}_{\mathbf{0}} \boldsymbol{(} \boldsymbol{\mu} \boldsymbol{\mathrm { m }} \boldsymbol{/} \mathbf{m i n} \boldsymbol{)}
2,5 \times 10^{-6} 28
4,0 \times 10^{-6} 40
1 \times 10^{-5} 70
2 \times 10^{-5} 95
4 \times 10^{-5} 112
1 \times 10^{-4} 128
2 \times 10^{-3} 139
1 \times 10^{-2} 140

Passo 1

O enunciado pede uma estimativa por inspeção dos parâmetros de Michaelis–Menten V_{\max} e K_{m} a partir dos pares [\mathrm{S}] e V_{0}. Na teoria enzimática, V_{\max} é a velocidade inicial máxima quando a enzima está saturada de substrato, e K_{m} é a concentração de substrato que dá V_{0}=V_{\max}/2.

Passo 2

Para estimar V_{\max}, examinamos os valores de V_{0} em valores de [\mathrm{S}] muito elevados. Nos dois maiores substratos, [\mathrm{S}]=2\times10^{-3}\,\mathrm{M} e [\mathrm{S}]=1\times10^{-2}\,\mathrm{M}, as velocidades são 139 e 140, \mu\mathrm{m/min}. Esses valores já não aumentam quase nada, indicando que a enzima está saturada. Logo,
V_{\max}\approx140\\ \mu\mathrm{m/min}.

Passo 3

Para estimar K_{m}, calculamos metade de V_{\max}:
\frac{V_{\max}}{2} = \frac{140}{2} = 70\\ \mu\mathrm{m/min}.
Em seguida, achamos no conjunto de dados a concentração de substrato que produz V_{0}\approx70. Vemos que quando [\mathrm{S}]=1\times10^{-5}\,\mathrm{M}, V_{0}=70, \mu\mathrm{m/min}. Portanto,
K_{m}\approx1\times10^{-5}\,\mathrm{M}.

Resposta

V_{\max}\approx140\\ \mu\mathrm{m/min} K_{m}\approx1\times10^{-5}\,\mathrm{M}

Exercícios relacionados