Com o objetivo de realizar a quantificação de vitamina B12 em um suco de laranja foi realizada a determinação espectrofotométrica deste analito empregando soluções analíticas de referência (soluções padrões de vitamina B12) análise da amostra de suco de laranja e do branco. O procedimento experimental adotado consistia em pipetar 30 mL do suco e transferi-lo para um balão volumétrico de 500 mL . Após, realizava-se a diluição da amostra com água destilada até completar o menisco. Posteriormente, cerca de 5 mL desta solução era introduzida em uma cubeta de quartzo e realizava-se a análise espectrofotométrica desta matriz. As soluções padrões eram obtidas a partir de diluições sucessivas de uma solução contendo vitamina B12 pura com água destilada, obtendo-se, assim, concentrações crescentes deste analito. Em seguida, as mesmas eram analisadas diretamente no equipamento. Os resultados experimentais obtidos para a análise desta amostra e das soluções analíticas de referência estão apresentados na tabela 1.
Tabela 1: Dados experimentais obtidos a partir das soluções analíticas de referência, amostra e branco
Tabela 1: Dados experimentais obtidos a partir das soluções analíticas de referência, amostra e branco
Solução | Concentração <br>
|
Área do composto <br>
|
---|---|---|
Padrão 1 | 0 | 0 |
Padrão 2 | 5 | 0,2 |
Padrão 3 | 10 | 0,4 |
Padrão 4 | 15 | 0,6 |
Padrão 4 | 20 | 0,8 |
Branco da Amostra | - | 0,045 |
Suco de Laranja | - | 0,543 |
Com base nestas informações, determine a concentração da vitamina B12 presente no suco de laranja
Obs: Demonstre todos os cálculos necessários para expressar seu raciocínio.
Obs: Demonstre todos os cálculos necessários para expressar seu raciocínio.
Passo 1
Beleza, o enunciado pede pra gente saber quanta vitamina B12 tem no suco de laranja usando espectrofotometria, comparando com soluções padrões. O conteúdo é a Lei de Beer–Lambert (A ∝ c) e construção de curva de calibração. Vamos precisar:
- Montar a reta de calibração a partir dos padrões.
- Corrigir a área da amostra subtraindo o branco.
- Usar a reta (ou coeficiente angular) pra achar a concentração da solução diluída.
- Voltar à concentração no suco original usando o fator de diluição (30 mL → 500 mL).
Passo 2
Teoria rápida: pela Lei de Beer–Lambert, a absorbância (ou área) A varia linearmente com a concentração c:
Nos nossos padrões vimos (0,0), (5,0.2), (10,0.4), (15,0.6), (20,0.8). Parece tudo em linha reta passando pela origem, então
Passo 3
Agora corrigimos a área medida no suco subtraindo o branco:
Passo 4
Com a reta
, a concentração na solução que foi colocada na cubeta é:
Passo 5
Como a gente pipetou 30 mL de suco num balão de 500 mL, o fator de diluição é
Logo a concentração no suco original é
Resposta
A concentração de vitamina B12 no suco de laranja é aproximadamente 207.5 mg/L.