QUESTÃO 1. Em última análise, as interações estabelecidas entre os aminoácidos componentes de uma dada cadeia polipeptídica irão, em conjunto com outros fatores, definir a estrutura tridimensional que a cadeia irá assumir em solução. A determinação desta estrutura pode, em muitas das vezes, auxiliar a compreensão do mecanismo de ação desta cadeia polipeptídica, e permitir o esclarecimento de suas funções em um determinado organismo que a produz. Assinale abaixo a afirmativa que não expressa uma estratégia experimental aplicável para a caracterização da estrutura tridimensional das cadeias polipeptídicas.
(A) Modelagem comparativa por homologia.
(B) Dicroísmo circular.
(C) Difração de raio X .
(D) Cromatografia Líquida de Fase Reversa.
(E) Ressonância magnética nuclear.
(A) Modelagem comparativa por homologia.
(B) Dicroísmo circular.
(C) Difração de raio X .
(D) Cromatografia Líquida de Fase Reversa.
(E) Ressonância magnética nuclear.
Passo 1
O enunciado pede para identificar qual das alternativas não é uma estratégia experimental aplicável à caracterização da estrutura tridimensional de cadeias polipeptídicas. As técnicas de interesse que efetivamente permitem obter informação estrutural em nível atômico ou secundário de proteínas em solução ou cristal são: dicroísmo circular, difração de raios X e ressonância magnética nuclear.
Passo 2
Modelagem comparativa por homologia é uma abordagem computacional, que usa estruturas conhecidas de proteínas similares como molde para prever a estrutura de uma proteína-alvo. Apesar de fornecer modelos 3D, não se trata de uma técnica experimental de laboratório.
Passo 3
Dicroísmo circular é uma técnica experimental que mede a diferença de absorção de luz polarizada e fornece informação sobre a fração de hélices α, folhas β e desordem em proteínas, ajudando a caracterizar sua estrutura secundária em solução.
Passo 4
Difração de raio X é uma técnica experimental cristalográfica que, a partir de um cristal de proteína, gera padrões de difração permitindo determinar a estrutura 3D atômica da molécula.
Passo 5
Ressonância magnética nuclear (RMN) é uma técnica experimental que explora os spins nucleares em solução, obtendo restrições de distância e ângulo entre átomos, o que viabiliza a determinação da estrutura 3D de proteínas solúveis.
Passo 6
Cromatografia líquida de fase reversa é uma técnica experimental de separação e purificação de peptídeos ou proteínas, mas não fornece diretamente informação sobre a estrutura tridimensional da cadeia polipeptídica.
Resposta
A modelagem comparativa por homologia não é uma estratégia experimental para caracterizar a estrutura 3D de proteínas, pois é um método computacional. Portanto, a alternativa que não expressa uma técnica experimental de estrutura é a (A).