A ação da amilase foi analisada através da reação de benedict analisando-se açúcar redutor formado (uM/min), utilizando amido como substrato (mM), a partir dos resultados elaborou-se um gráfico de Lineweaver-Burk, e obteve-se a seguinte equação da reta:
, calcule Vmáx e Km da reação catalisada pela amilase:
Passo 1
O enunciado fornece a equação da reta do gráfico de Lineweaver–Burk obtido experimentalmente e pede que se calcule os parâmetros cinéticos
e
. Dados fornecidos:
- Equação da reta (Lineweaver–Burk):
. - As taxas
foram medidas em (açúcar redutor formado) e as concentrações de substrato estão em .
O que é pedido:
- Calcular
(com as unidades compatíveis com as medidas de velocidade). - Calcular
(com as mesmas unidades de , ou seja ).
Passo 2
Entender a relação de Lineweaver–Burk e o que representam coeficientes da reta.
A linearização de Lineweaver–Burk é obtida a partir da equação de Michaelis–Menten e tem a forma
Aqui:
-
é a ordenada do gráfico (unidade: , porque está em ). -
é a abscissa do gráfico (unidade: se está em ). - O coeficiente angular (declive) da reta é
. - O coeficiente linear (intercepto em
) é .
Portanto, dada a reta
, tem-se:
Passo 3
Identificar slope e intercept da equação fornecida e anotar unidades.
Da equação dada (peguei estes números do enunciado):
Da equação dada
-
(isto é , unidade: ), -
(isto é , unidade: ).
Passo 4
Calcular
a partir do intercepto.
Usando
intercepto, temos
Invertemos ambos os lados para obter
:
Fazendo a divisão (mostro o cálculo): o inverso de
é aproximadamente
. Logo
Passo 5
Calcular
. Há duas formas equivalentes; uso a forma direta mais simples:
Ou, usando intercepto, como
intercepto, segue também
Aplicando os números (pegados da reta):
Como
foi dado em
, o resultado para
fica em
:
Passo 6
Verificação rápida de consistência e comentários práticos.
Verificação: usando
e
,
o que confere com o slope dado. Unidades estão consistentes:
em
e
em
.
Dica para prova: ao ver uma equação de Lineweaver–Burk, memorize que o intercepto em
é
e o slope é
. Assim você pode obter os parâmetros com duas operações simples (inverso e divisão).